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大專畢業論文范文，大專畢業論文怎么寫( 二 )

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【大專畢業論文范文，大專畢業論文怎么寫】

大專畢業論文范文，大專畢業論文怎么寫


4，專科院校畢業生需要寫畢業論文嗎您好，一般專科院校畢業生是需要寫畢業論文的，不過專科院校的畢業論文一般和本科院校有所差別，個別職業技術學院畢業論文要求和本科畢業論文差異還挺大的，答主所了解的差異主要有：1，字數要求不一樣，本科院校畢業論文字數一般要求七八千字乃至上萬字，大專學校畢業論文最多要求5000字，一般在4000-5000字 。2，格式不一樣，正規本科學校一般對格式尤其是參考文獻等方面要求更高，大專學校的畢業論文則要求相對要低一些 。3，論文側重點不一樣，本科畢業論文重視理論，大專學校畢業論文則側重實踐，一般情況下大專畢業論文會在學生進行一次大型的校內或校外畢業實踐之后完成，重點寫理論知識與實踐的結合 。以上三個屬于本科畢業論文和大專畢業論文最大的差異，其實兩者的畢業論文也有相似之處，主要相似之處在于畢業論文之后的答辯，很多大專院校現在都要求學生寫畢業論文并進行答辯，這一方面是向本科學校學習的 。所以要想從正規大專學校畢業，一定要寫好畢業論文，同時好好準備答辯 。以上觀點僅供參考，歡迎大家提建議，歡迎大家關注嬌羞帝老師，您的關注和點贊將是我前進的最大動力 。5，大學畢業論文的格式有模版更好 國家“十一五”教育規劃中明確指出，中國要大力發展職業教育，培養實用性、技能型職業人才 。“秘書”被列入國家勞動和社會保障部的職業目錄后，秘書培養模式從應試型培訓輔導逐漸向實用型訓練派遣過渡，各高等院校、培訓機構也紛紛推出了秘書專業和各種名目繁多的秘書訓練班，但效果又是如何呢？訓練出來的秘書職業真正具有實用性嗎？很多高校和培訓機構也都是一頭霧水，因為他們還無法對現代職業化秘書進行準確定位，也難怪他們訓練不出實用型職業秘書 。因此，通過等級考證的秘書人員對秘書職業的把握也是朦朦朧朧，在就業和創業的歷程中滿腹的迷茫和困惑 。從古代皇帝的左丞右相，到今天的領導身邊的左右手，秘書職業已經從古代的文書起草，演變成今天“出謀劃策，當好助手”的職業白領 。秘書職業的角色定位發生了翻天覆地的變化，我們還是一味捧著《秘書學原理》來訓練秘書的話，就會離職業秘書訓練的路會越走越遠，所培養出來的秘書充滿著理論味和書生味，若真正運用到風云變化的職場中去，只能是束手無策 。因此，我們很有必要對現代職業化秘書角色進行準確地定位，并以市場需求為中心，進行職業訓練，現代職場需要什么樣的秘書，我們就要訓練出什么樣的職業秘書 。什么是市場所迫切需要的職業秘書呢？根據幾年來自己從事秘書職業的實踐，以及擔任福州丞心秘書事務有限公司名譽顧問的機會，有幸接觸了現代職業秘書訓練的全過程，并對職業秘書訓練產生濃厚的興趣 。現在，中國缺乏的不是機關秘書，而大量缺乏的是公司秘書 。據不完全統計，我國目前公司秘書職業需要量達到1000萬人，而這些職位目前大部分都是由未接受到專業訓練的人員承擔，公司為這些秘書的不專業大傷腦筋，大專疾呼：“秘書，想說愛你不容易” 。為什么會這樣呢？傳統的秘書，一味地停留在抄抄寫寫的文書工作，或者是停留在陪吃陪喝的公關接待上，就認為萬事大吉了，稱職了 。而企業、公司期望的現代職業秘書不僅僅是以上這些，而是需要秘書在“當好助手”的同時，重要是要能夠“出謀劃策”，為公司效力，為公司出業績，為公司創效益 。而“出謀劃策”的本領，卻不是一般的秘書人員可以勝任的，需要規范化的秘書實務訓練和長期的秘書工作實踐積累 。怎樣訓練“出謀劃策，當好助手”的職業秘書呢？我個人認為，現代職業化秘書的訓練必須著重訓練兩個方面素質，那就是職業秘書人員的“做人”和“做事” 。秘書“做人”，指的是秘書人員的人品（職業道德）和人樣（職業形象）；秘書“做事”，指的是職業秘書人員必須具備的五種能力，即創新能力、執行能力、溝通能力、商業能力和寫作能力，并且要能夠做到五力合一，形成合力 。滿意的話請采納下！！你可以自己先在網上看看啊 因為自己寫的還要好 具體又不了解你的情況6，工商管理專科畢業論文范文關于工商管理畢業論文的選題和寫作一、畢業論文的選題選題是論文寫作的首要環節 。選題的好壞直接關系到論文的學術價值和使用價值，新穎性、先進性、開創性、適用性以及寫作的難易程度等 。下面重點談談選題的原則：1．要客觀需要，頗有價值 。選題要根據我國經濟建設的需要，具有重大的理論和實用價值 。例如“企業聯盟問題研究”，就是這樣 。正如一汽集團李啟祥副總經理說，我國汽車與國外的汽車競爭，無論是技術、質量、品牌、功能、成本和規模經濟等都比不過人家，只能靠一體化，戰略聯盟，與“大眾”合資進入世界大汽車集團，靠國外發展自己 。因此，關于戰略聯盟的研究，既滿足了我國經濟建設的需要，又具有重大的理論和實用價值 。2．要捕捉靈感，注重創新 。論文的生命在于創新 。創新的含義非常廣泛，是指一種新的觀點，創立新說，新的論據(新材料)，新的補充，新的方法，新的角度 。也有人說創新指研究的內容是新的，方法是新的，內容與方法都是新的 。還有人認為創新指獨特見解，提出前人未曾提出過的問題，糾正前人的錯誤觀點，對前人成果進一步深化、細化、量化和簡化等 。由上可見，一篇論文總要有一點創新，否則就算不上真正的論文 。創新靠靈感，靈感靠積累 。只有在長期的艱苦砥礪中才能偶然產生一點思想的火花，而這稍縱即逝的思想火花就可能變成學術創新的起點 。當然，創新也不能完全脫離前人的研究成果，不能離開管理學的主流思想，不能沒有創新平臺，而是建立一個獨立的體系，否則不會成功 。(創新思維方法后述)3．要聯系實際，關注熱點 。管理學的理論和實踐問題都很多，特別是當前中國經濟劇變，世界經濟一體化，各種新事物，新問題層出不窮，可以研究的對象，可以作為論文選題的問題，俯拾皆是 。對于學習管理學的學生來說，無疑是一個空前的機遇 。根據中國的實際國情，現階段還是研究實際問題較易出成果和被社會接受 。從研究經濟管理現實問題，得出可以操作的政策性結論，這對中國經濟的改革與發展會產生立竽見影的效果，意義是深遠的 。但是，千萬不要趕“時髦”，湊“熱鬧” 。因為“熱點”問題是大家都關注的問題，不易創新 。一定要根據自身的業務專長等來選擇熱點題目 。聯系實際，問題要抓準，抓準問題的題目，一看題目就會吸引人 。4．要題目大小適宜，發掘的深 。題目太大不好把握，往往流于空洞膚淺，人云亦云，最后成為平庸之作 。一般來說題目大小要適宜，或小點好駕馭，容易寫得豐滿 。但也不要小到象本單位的工作總結，或意見建議書 。論文要求深刻和嚴謹 。所謂深刻就是對某一問題進行深層次、多角度、全方位的探討 。所謂嚴謹就是觀點鮮明，論證有力，層次清晰，語言規范 。有的學員怕題目小了，難以展開分析，幾句話就說完，甚至連要求的字數也不夠 。解決這個問題的辦法，就是“小題大做”，即從各種不同角度，不同層面展開分析某一“小問題”，要多用些具體材料，圖表、公式來證明表達自己的觀點 。這樣，既可以使論文充實、豐滿、具有說服力，又可以解決字數不足問題 。題目大小適當，才能在短時間內經過努力，可以圓滿完成寫作任務 。5．要逆向思維，搜尋盲點 。熱點問題是被普遍關注的問題，寫的人多，創新難度加大 。如果逆向思維，尋找那些人們忽視的問題和領域，或者換一個角度看問題，則可能更容易出成果 。這就要求選題時，要有逆向思維的意識，不隨大流，不人云亦云 。在一些邊界地區，交叉領地可能有更重要的問題需要研究 。當然盲點問題也是一個相對的概念，是現實生活中已經發生，但還沒引起人們普遍關注的問題 。這不但要求我們具有逆向思維的意識，而且還要具有思維的敏銳性和超前性，可以明察秋毫，每天都有新事物、新問題出現，就看我們是否善于發現和捕捉 。6．要適應自己的主客觀條件 。選題要適應自己的主觀條件，包括自己的專業特長，對所選題目的興趣，已占有的資料，原有的理論基礎，現有的學術平臺；以及適應客觀上能夠為自己提供的資料和時間保證等 。最好是選擇自己比較熟悉的題目 。這樣，才能做到材料充實，有感而發 。也就是說應該選擇主客觀都有可能，來完成這一寫作任務的題目 。7．要在申請人所學專業范圍之內 。選題要在管理學范圍之內 。根據管理學科新的分類標準，工商管理類包括：工商管理(工商行政、企業管理、房地產、旅游等)、市場營銷、人力資源管理、會計學、財務管理 。我們書上P16-54，管理學、市場營銷、人力資源管理三個方面的題目，做為備選范圍 。超出這一范圍的作為不及格 。8．要參考選題，自定與導師同意 。(1)三個方面選題任選其一 。書中P16-54，列出三個方面的備選題 。三個方向選題界限有交叉、重復，例如企業核心能力問題，企業文化等 。原因是三個教學部分別提供的選題，沒有整理和歸納 。學員可從這三個方向的題目中任選其一 。(2)學員也可以在三個方向選題范圍之內，自己確定，經導師同意 。在選題范圍內，具體題目可調整 。二、論文寫作(一)畢業論文寫作的內容結構畢業論文寫作的內容包括：P6內容摘要與關鍵詞(中、外文)、目錄、正文、注釋、附錄、參考文獻、封面、封底 。(二)畢業論文寫作步驟畢業論文寫作步驟：確定選題，收集材料，確定主要參考書目，寫開題報告和寫作提綱，初稿，二稿和定稿 。定稿后答辯準備和答辯 。下面強調收集材料，開題報告和寫作提綱，初稿，二稿和定稿 。1．收集材料 。題目確定之后，要在題目所涉及的領域廣泛收集材料 。材料一般分為兩類，即理論材料和事實材料 。理論材料可以到圖書館、資料室、理論性刊物、互聯網上按分類目錄查找 。事實材料，可從圖書、報刊資料中，自己親身接觸到的，他人工作經驗，工作中的統計資料、案例等查找 。有條件的可以親自調查研究 。收集材料要多積精選 。選擇材料的標準，最大限度的選擇資料，應為必要的；最小限度選擇資料，應為充分的 。收集材料時應注意，真實性(出處；二手資料要與原始材料核對)，具體性(數據、比例、比率要確切，不能含混)，新穎性(新穎的材料才有新結論) 。對資料要“去粗取精，去偽存真，由此及彼，由表及里”的認真研究 。有人把它概括為：“捕捉信息、鑒別、濃縮、存儲信息” 。總之，收集材料的過程也是分類整理和研究的過程，對材料的比較、思考和篩選，是論文立論和論證的前提和基礎 。2．開題報告 。詳見書P14- 。3．擬定寫作提綱 。提綱的好處，幫助樹立全局觀點，疏通思路，安排材料及組成合理的筍印等 。擬定提綱過程中，為了把準備使用的材料組成一個層次清楚，有嚴密邏輯關系的理論體系，不僅會有大量的材料需要取舍、增刪、調整，而且還要考慮論文的布局、觀點與材提綱的寫法有兩種：一是標題的寫法，二是句子寫法 。無論哪種寫法，都首先要擬定標題，論文的標題有兩種類型，一是指示論點的標題，即把論點概括而形成的標題 。另一是指示課題的標題，即揭示研究的是什么問題 。，4．寫作初稿 。這里主要強調內容提要和正文的寫作 。(1)內容提要 。內容提要是學位論文的縮影，是一篇完整的短文 。它主要包括：說明作者對論文寫作課題的研究目的、方法、成果，特別是要說明本文的新見解和創造性成果 。文字要簡練，并譯成相應的外文 。注明3—5個具有代表意義和提綱契領的“關鍵詞” 。，(2)寫作正文 。正文是論文的主體部分，通常由緒論(引論)、本論、結論三部分組成 。①緒論 。緒論主要應說明研究這一課題的理由、意義，提出問題，有時簡單地寫一點歷史的回顧，本文的基本思路，以及對這一課題研究所使用的方法等 。②本論 。本論是學位論文的主體核心部分，應包括理論分析、論點、論述、創新等 。這里著重談談確立論點和對論點的論述；開拓創新性思考 。確立論點和對論點的論述 。論點是文章的靈魂和文章的價值之所在 。論點在糾正前說的文章中；指前言錯在何處，正確的觀點是什么，根據是什么 。再如主張什么，反對什么 。論點要準確、明白、突出 。論點是對資料的分析研究中產生的，不要先定論點，然后找材料印證 。論點的形成實際上就是對資料進行整理、分析、概括的過程 。作者要從資料中理出頭緒宋，并從中發現問題 。發現問題是解決問題的第一步 。確立論點的能力主要是抽象的能力，就是在浩繁的資料中抽出帶有規律性的東西 。論述是指用論據闡明論點的過程 。論點確立后，就是對論點進行論述了 。論述要嚴密 。在論述過程中一定要處理好論點與論據的關系 。論點是由論據來說明的，論據又是由論點來統帥的 。論點和論據是辯證的統一 。在論述過程中，必須使論點和論據形成統一的有機整體使論據很好地為闡述論點服務 。材料與觀點要統一，把材料組織起來去說明自己的論點 。論述層次要清楚，例如把問題分成三個論點，即三個層次進行論述 。論述還要以可靠的例證，翔實的材料，優美的形式來表達自己的思想觀點，論述的語言要生動、鮮明等 。論述的能力主要是指邏輯思維、推理、判斷的能力 。開拓創新性思考 。開拓創新性思考的目的，是為了使自己對所研究的對象早日有所發現，或早日突破前人已有的成果，達到新的發明創造 。李景隆先生對開拓創造性思考問題，歸納了三個基本條件：豐富的貯存；加大信息間作用的概率；加大解決問題的勢能 。沒有這三個條件創造思維不可能形成 。這是指讀的書越多，收集的資料越豐富，專業水平越高，形成創造性思考的可能性才·越大 。而人在大腦中貯存的大量信息，又會互相作用，其結果就會形成新的思考 。加大信息間作用概率，就會使創造性思考形成的可能性增大 。開拓創造性思考，除了這三個基本條件外，一些研究者還認為它與作者應具有的品格有極大的關系 。這就是豐富的想象、強烈的好奇心和對問題的濃厚的興趣 。7，漢語言專科畢業論文怎么寫 新詞新語是觀察社會生活的晴雨表，是反映現實的一面鏡子 。處于轉型期的中國社會，其人文景觀絢麗多彩 。改革的大門開放以后，國外文化蜂擁而來 。諸如“的士”、“酒吧”等詞語紛至沓來 。國內國外文化相互碰撞，彼此之間相互交融、相互滲透，產生了一批反映時代變革的新詞新語 。隨著國內旅游熱興起，在市場經濟的驅動下，許多農村人口投身于旅游景點的商業服務，于是便在原先的交通工具上精心修飾，仿照“的士”，出現了“馬的”、“驢的”、“轎的”、“摩的”、“板的”等系列新詞 。這種由修辭方式構成的新詞從一個側面反映了旅游文化的發展，農業文明開始向現代文明轉換 。研究這種新詞新語具有廣義文化學的意義 。研究這種新詞語還有社會學的意義 。一、“修辭學造詞法”詮釋 詞匯就其本身而言是一個開放的系統，而新詞的產生概括的說不外乎兩條途徑：一是構造新詞，二是吸收外來詞 。當今時代是一個信息爆炸的時代，各種新的事物、新的現象不斷出現，由此導致了人們的新觀念、新感受的不斷產生，面對這種現象，原有的詞匯難免會出現供不應求的現象 。于是人們便傾向于尋求各種造詞手段來對客觀世界大量的空符號作及時有效的補充 。產生新詞新語的方式很多，有新外來詞語的吸收、舊詞語的復活、方言詞語的吸收等等 。我們著重要談的是以修辭方式構成的新詞的研究 。二、比喻造詞法 從結構上看，新詞新語里運用比喻這種修辭格的，以喻體作修飾成分，本體類屬作中心詞，構成新詞語 。如： 龍頭企業 拳頭產品 窗口行業 星火計劃 胡子工程 尾巴工程 三、借代造詞法 用借代修辭格形成的新詞語: ⑴、以專稱代指通稱 。如：伯樂，原為韓愈《馬說》中的人名，擅長相馬的人后來代指擅長發現人才推薦人才的人 。硅谷：源自美國，電子工業基地，現代指電子工業基地 。三、仿擬構成新詞的特點及趨勢 由仿擬構成的新詞語到底具有什麼樣的特點？首先，仿擬型新詞語具有對應性 。仿擬性新詞語與原型詞之間存在對應關系 。仿擬型新詞語中以類義、對義、反義等關系構成的語義仿新詞語是對應性的突出體現 。格式仿中許多新詞語內部甚至也表現了類義、對義的對應關系 。其次，仿擬型新詞語具有鮮明的感情色彩 。有的帶有表揚傾向，如“新秀”；有的帶有嘲諷、戲謔的色彩，如“喇叭虧”、“家庭婦男”等；有的則帶有較強的貶義色彩，如“以權謀私” 。鮮明的感情色彩，反映了這類新詞語的構成與“仿擬”這一修辭手段運用的內在聯系 。再次，仿擬型新詞語體現了仿擬構詞手段的豐富性 。從這類詞語的構成方式看，仿擬詞與原型詞之間，涉及音、形、義三個方面 。就拿“語義仿”來說吧，語義上的“類義”、“反義”都可以作為聯想的線索，這就使仿擬構詞具有豐富的手段，構成新詞的能力也較強 。結束語 近些年，有的人為了標新立異，或者為了達到一定的目的，特別是一些廣告媒體，無視語言規律，利用諧音胡亂造詞，如“咳不容緩”、“衣衣不舍”等等 。這些“詞語”意義上完全背離了原詞，長此以往，詞將不詞了 。但從總體上說，仿擬能產性強，生命力強，其積極作用是主要的，它符合詞匯發展的總趨勢 。1、論文題目：要求準確、簡練、醒目、新穎 。2、目錄：目錄是論文中主要段落的簡表 。（短篇論文不必列目錄）3、提要：是文章主要內容的摘錄，要求短、精、完整 。字數少可幾十字，多不超過三百字為宜 。4、關鍵詞或主題詞：關鍵詞是從論文的題名、提要和正文中選取出來的，是對表述論文的中心內容有實質意義的詞匯 。關鍵詞是用作機系統標引論文內容特征的詞語，便于信息系統匯集，以供讀者檢索 。每篇論文一般選取3-8個詞匯作為關鍵詞，另起一行，排在“提要”的左下方 。主題詞是經過規范化的詞，在確定主題詞時，要對論文進行主題，依照標引和組配規則轉換成主題詞表中的規范詞語 。5、論文正文：（1）引言：引言又稱前言、序言和導言，用在論文的開頭 。引言一般要概括地寫出作者意圖，說明選題的目的和意義, 并指出論文寫作的范圍 。引言要短小精悍、緊扣主題 。〈2）論文正文：正文是論文的主體，正文應包括論點、論據、 論證過程和結論 。主體部分包括以下內容：a.提出-論點；b.分析問題-論據和論證；c.解決問題-論證與步驟；d.結論 。6、一篇論文的參考文獻是將論文在和寫作中可參考或引證的主要文獻資料，列于論文的末尾 。參考文獻應另起一頁，標注方式按《GB7714-87文后參考文獻著錄規則》進行 。中文：標題--作者--出版物信息（版地、版者、版期）：作者--標題--出版物信息所列參考文獻的要求是：（1）所列參考文獻應是正式出版物，以便讀者考證 。（2）所列舉的參考文獻要標明序號、著作或文章的標題、作者、出版物信息 。8，大專的畢業論文怎么寫啊 大專畢業論文的寫作格式、流程與寫作技巧 廣義來說，凡屬論述科學技術內容的作品，都稱作科學著述，如原始論著（論文）、簡報、綜合報告、進展報告、文獻綜述、述評、專著、匯編、教科書和科普讀物等 。但其中只有原始論著及其簡報是原始的、主要的、第一性的、涉及到創造發明等知識產權的 。其它的當然也很重要，但都是加工的、發展的、為特定應用目的和對象而撰寫的 。下面僅就論文的撰寫談一些體會 。在討論論文寫作時也不準備談有關稿件撰寫的各種規定及細則 。主要談的是論文寫作中容易發生的問題和經驗，是論文寫作道德和書寫內容的規范問題 。論文寫作的要求下面按論文的結構順序依次敘述 。(一)論文——題目科學論文都有題目，不能“無題” 。論文題目一般20字左右 。題目大小應與內容符合，盡量不設副題，不用第1報、第2報之類 。論文題目都用直敘口氣，不用驚嘆號或問號，也不能將科學論文題目寫成廣告語或新聞報道用語 。(二)論文——署名科學論文應該署真名和真實的工作單位 。主要體現責任、成果歸屬并便于后人追蹤研究 。嚴格意義上的論文作者是指對選題、論證、查閱文獻、方案設計、建立方法、實驗操作、整理資料、歸納總結、撰寫成文等全過程負責的人，應該是能解答論文的有關問題者 。現在往往把參加工作的人全部列上，那就應該以貢獻大小依次排列 。論文署名應征得本人同意 。學術指導人根據實際情況既可以列為論文作者，也可以一般致謝 。行政領導人一般不署名 。(三)論文——引言 是論文引人入勝之言，很重要，要寫好 。一段好的論文引言常能使讀者明白你這份工作的發展歷程和在這一研究方向中的位置 。要寫出論文立題依據、基礎、背景、研究目的 。要復習必要的文獻、寫明問題的發展 。文字要簡練 。(四)論文——材料和方法 按規定如實寫出實驗對象、器材、動物和試劑及其規格，寫出實驗方法、指標、判斷標準等，寫出實驗設計、分組、統計方法等 。這些按雜志 對論文投稿規定辦即可 。(五)論文——實驗結果 應高度歸納，精心分析，合乎邏輯地鋪述 。應該去粗取精，去偽存真，但不能因不符合自己的意圖而主觀取舍，更不能弄虛作假 。只有在技術不熟練或儀器不穩定時期所得的數據、在技術故障或操作錯誤時所得的數據和不符合實驗條件時所得的數據才能廢棄不用 。而且必須在發現問題當時就在原始記錄上注明原因，不能在總結處理時因不合常態而任意剔除 。廢棄這類數據時應將在同樣條件下、同一時期的實驗數據一并廢棄，不能只廢棄不合己意者 。實驗結果的整理應緊扣主題，刪繁就簡，有些數據不一定適合于這一篇論文，可留作它用，不要硬行拼湊到一篇論文中 。論文行文應盡量采用專業術語 。能用表的不要用圖，可以不用圖表的最好不要用圖表，以免多占篇幅，增加排版困難 。文、表、圖互不重復 。實驗中的偶然現象和意外變故等特殊情況應作必要的交代，不要隨意丟棄 。(六)論文——討論 是論文中比較重要，也是比較難寫的一部分 。應統觀全局，抓住主要的有爭議問題，從感性認識提高到理性認識進行論說 。要對實驗結果作出分析、推理，而不要重復敘述實驗結果 。應著重對國內外相關文獻中的結果與觀點作出討論，表明自己的觀點，尤其不應回避相對立的觀點 。論文的討論中可以提出假設，提出本題的發展設想，但分寸應該恰當，不能寫成“科幻”或“暢想” 。(七)論文——結語或結論 論文的結語應寫出明確可靠的結果，寫出確鑿的結論 。論文的文字應簡潔，可逐條寫出 。不要用“小結”之類含糊其辭的詞 。(八)論文——參考義獻 這是論文中很重要、也是存在問題較多的一部分 。列出論文參考文獻的目的是讓讀者了解論文研究命題的來龍去脈，便于查找，同時也是尊重前人勞動，對自己的工作有準確的定位 。因此這里既有技術問題，也有科學道德問題 。一篇論文中幾乎自始至終都有需要引用參考文獻之處 。如論文引言中應引上對本題最重要、最直接有關的文獻;在方法中應引上所采用或借鑒的方法；在結果中有時要引上與文獻對比的資料；在討論中更應引上與 論文有關的各種支持的或有矛盾的結果或觀點等 。(九)論文——致謝 論文的指導者、技術協助者、提供特殊試劑或器材者、經費資助者和提出過重要建議者都屬于致謝對象 。論文致謝應該是真誠的、實在的，不要庸俗化 。不要泛泛地致謝、不要只謝教授不謝旁人 。寫論文致謝前應征得被致謝者的同意，不能拉大旗作虎皮 。(十)論文——摘要或提要：以200字左右簡要地概括論文全文 。常放篇首 。論文摘要需精心撰寫，有吸引力 。要讓讀者看了論文摘要就像看到了論文的縮影，或者看了論文摘要就想繼續看論文的有關部分 。此外，還應給出幾個關鍵詞，關鍵詞應寫出真正關鍵的學術詞匯，不要硬湊一般性用詞 。9，生物技術應用大專畢業論文怎么寫微生物技術在城市生活垃圾處理中的應用摘要：本文結合堆肥化、衛生填埋兩種現行的城市生活垃圾處理工藝，主要介紹了城市生活垃圾生物處理過程中的微生物種群，以及通過分析開發出的新的微生物技術，指出了應用于城市生活垃圾處理的高效的微生物技術的研究方向 。關鍵詞：城市生活垃圾 微生物 強化微生物處理技術 基因工程; 隨著城市化進程在全球范圍的加速，城市化帶來的污染和人類聚居狀況惡化等問題，已成為世界各國共同關心的問題 。城市生活垃圾（Municipal solid waste, 簡稱MSW）是在城市日常生活及為城市生活提供服務的活動中產生的固體廢棄物，是城市環境的主要污染物之一 。目前，城市生活垃圾處理處置的方法主要包括衛生填埋（Sanitary landfill）、堆肥化(Composting)、焚燒(Incineration)三種，其中前兩種處理方式均屬于生物處理技術 。具體來說，MSW生物處理技術就是城市生活垃圾中固有的或外添加的微生物，在一定控制條件下，進行一系列的生物化學反應，使得MSW中的不穩定的有機物代謝后釋放能量或轉化為新的細胞物質，從而MSW逐步達穩定化的一個生化過程 。1. 城市生活垃圾生物處理中主要的微生物 。。。www.lw54.com采納哦分子生物技術在微生物降解環境 污染物中的應用 [摘要〕介紹了與環境微生物關鍵降解酶基因的篩選、克隆及應用相關的分r生物技術，包括聚合酶鏈式反應技 術、基因重組技術、熒光原位雜交技術和生物信息學等技術，并對這些技術在污染物降解基因檢測、篩選和克隆方 面的應用進行了闡述與探討、 [關鍵詞]分子生物技術;微生物;基因;環境污染物;降解 隨著現代j:\地技術的發展，多環芳烴、含氯有 機物和硝基苯類化合物等人工合成井難以降解的 污染物大量排放，造成世界范圍內的環境污染和生 態破壞，嚴重地威脅人類和其他生物的正常生存和 發展 。利用微生物修復技術對受污染的水體及土 壤進行處理，凸顯了其重要的意義和可行性 。研究 人員發現并篩選到一些微生物，它們不僅對環境有 較高的適應性、對污染物有較高的耐受性，而且對 污染物有較強的降解效率和專一性 。然而環境中 存在的大量微生物中僅有少于1%可通過傳統的培 養方法進行培養、分離和純化，絕大多數細菌需要 非常嚴格的營養條件川 。因此，為了對修復環境有 所貢獻卻難以培養的微生物進行更全面了解，也為 了篩選到更多有利于降解環境污染物的微生物菌 種及其關鍵酶基因，分子生物技術和手段逐漸被廣 泛應用到環境可降解污染物及降解機理方面的研 究中 。本文對近年來發展起來的聚合酶鏈式反應 (pcr)技術、基因重組技術、熒光原位雜交(fish) 技術和生物信息學等多種分子生物技術進行了介 紹，并總結了它們在污染物降解基因檢測、篩選和 克隆方面的應用 。1與環境污染物降解相關的分子生 物技術 1.1pcr及其相關技術 pcr是一種利用脫氧核糖核酸(dna)半保留 復制原理，在體外擴增位于兩段已知序列之間的 dna區段從而得到大量拷貝的分子生物技術 。根 據其模板、引物來源或擴增條件的不同，pcr技術 可分為以下幾種:(l)反轉錄pcr(rt一per)技 術，將mrna反轉錄為cdna后再對其進行pcr 擴增，可用來構建cdna文庫，分析不同生長時期 的mrna表達狀況和相關性以及mrna的定量測 定等;(2)巢式pcr技術，在擴增大片段目的dna 時，先用非特意性引物擴增再用特意性引物對第一 次擴增產物進行第二次擴增，以獲得可供分析的 dna;(3)競爭pcr技術，是一種定量pcr，向pcr 反應體系中加人人工構建的帶有突變的競爭模板，通過控制競爭模板的濃度來確定目的模板的濃度，對目的模板作定量研究;(4)實時熒光定量pcr技 術，在pcr反應體系中加人熒光基團，利用熒光信 號積累實時監測整個pcr進程，最后通過標準曲線 對未知模板進行定量分析，該法已廣泛用于基因表 達研究、轉基因研究等方面;(5)擴增的rdna限制 酶切分析技術，根據原核生物rdna序列的保守性，將擴增的rdna片段進行酶切，通過酶切圖譜來分 析菌間的多樣性;(6)rna隨機引導pcr技術，基 于任意寡核昔酸引物與rna之間可能的配對，在 低嚴謹度條件下經聚合酶催化使鏈延伸，將細胞總 rna或inrna作為反轉錄反應的模板，此技術結 合單鏈構象多態性，用非變性膠分辨大小相同而構 象不同的片段，可用于診斷遺傳突變及分析污染條 件下序列的多態性;(7)隨機擴增多態dna (rapd)技術，是一種基于pcr檢測pcr引物結合 位點序列改變的方法，通常以10bp的寡核昔酸序 列為引物，對基因組dna隨機擴增，電泳分離染色 擴增產物，再分析多態性 。1.2fish技術 fish技術利用熒光標記的探針在細胞內與特 異的互補核酸序列雜交，通過激發雜交探針的熒光 來檢測信號 。熒光探針比放射性探針更安全，具有 較好的分辨力，不需要額外的檢測步驟 。近年來，由于fish技術具有靈敏、便捷等優點，迅速發展完 善成為研究環境微生物的有力工具 。此外，可用不 同激發和散射波長的熒光染料標記探針，在一步反 應中同時檢測幾個靶序列 。該技術主要包括試樣 固定、預處理、預雜交、探針和試樣變性、雜交、漂洗 去除未結合的探針、檢測雜交信號等步驟 。由于 165rrna具有遺傳穩定性，因此成為fish技術檢 測最常用的靶序列 。1.3基因重組技術 基因重組技術是從供體生物的基因組中通過 酶切擴增等手段獲取目的基因，與載體連接形成重 組dna分子，再導入到受體細胞中，讓外源基因得 以表達 。在已經分離出的許多菌株中，與降解能力 有關的基因多在質粒體上 。由于質粒很容易在細 菌的繁殖過程中遺失，對細菌降解能力的長期穩定 非常不利，可將其與污染物降解有關的酶基因重組 到大腸桿菌等微生物中進行表達，以此構建的各種 生物降解特性增強的重組菌可用于污染環境的治 理修復或發酵某些廢棄物 。1.4生物信息學 20世紀后期，生物學的迅猛發展，從數量上和 質量上極大地豐富了基因組數據庫、蛋白質數據 庫、酶數據庫和文獻數據庫等許多生物科學的數據 資源 。已有多個國家和國際科研組織建立了生物 信息數據庫，如歐洲分子生物學實驗室(eur叩ean molecularbiologylaboratory)核酸序列數據庫和美 國國家生物技術情報中心(nationaleente:fo:bio- technologyinformation，ncbi)基因序列數據庫等 。科學家利用計算機及生物信息分析軟件分析這些 數據資源，確定大分子序列、結構、表達模式和生化 途徑與生物數據之間的關系，區分生物個體間遺傳 差異，揭示dna多樣性 。例如，基本局部比對搜索 工具(basieloealalignmentsearehtool，blast)，是一套在蛋白質數據庫或dna數據庫中進行相似 性比較的分析工具 。它基于altschul等的方法「2〕，在序列數據庫中對查詢序列進行同源性比對工作 。blast程序可對一條或多條、任何數量、任何形式的 序列在一個或多個核酸或蛋白序列庫中進行比對，甚 至將有缺口的比對序列也考慮在內，利用比較結果中 的得分對序列進行相似性說明 。基因的序列分析可 揭示出生物物種之間的關系，在污染治理研究中可用 于生物基因組特殊區域或特異基因的測序 。2分子生物技術在環境污染物降解 中的應用 2.1土壤試樣總dna的提取 用適當方法直接從土壤中提取dna并純化，是從分子生物學角度對土壤微生物進行研究的前 提條件，而后可進行酶切、pcr擴增、核酸分子雜交 等分子生物學技術操作 。從土壤中提取微生物 dna主要分為汽接法和間接法}{ 。直接法是在 ogram等的方法基礎卜發展起來的，其主要包括2 個步驟:(l)原位細胞裂解;(2)dna提取和純化 。直接法提取的dna超過細菌總dna的60%且省 力，但提取的dna常常有折斷、腐殖酸污染、甚至 提取物中還夾雜有未知的胞外dna和真核生物的 dna 。最先報道間接法的是faegri等[〕，其主要包 括4個步驟:(l)分散土壤;(2)分離細胞與土壤; (3)細胞裂解;(4)dna純化 。間接法提取dna 產量低且費力，但純度較高、dna損傷小，提取的 大片段dna可用來構建cos而d和細菌人工染色體 文庫等 。2.2采用pcr及相關技術擴增分析dna片段 可降解污染物的微生物必然能產生分解代謝 該污染物的酶 。selvaratnam等ll用編碼苯酚單加 氧酶dmpn摹因的rt一pcr技術來檢測序列間歇 式活性污泥反應器{一，降解酚的假單胞菌 。檢測結 果表明，rt一pcr技術不僅能檢測微生物降解酚的 能力，還能測量dmpn基因的轉錄水平，從而確定假 單胞菌特殊的分解活性，發現了在轉錄水平下，酚 濃度與通氣時間之問存在正相關關系 。將pcr技術和變性梯度凝膠電泳(dgge)結 合起來，在變性條件適當的情況下能分辨一個堿基 對，分辨率較高 。染色后的凝膠用成像系統進行分 析，可在一定程度l幾反應試樣的復雜性 。條帶的多 少能反應試樣「 一 }1微生物組成的差異，條帶的亮度能 反應試樣中微生物的多少 。基于以上優點，日前該 技術在微生物群落結構的分析和動態研究方面得 到了廠泛應用 。dgge可通過分析pcr擴增的基 因點突變來探索微生物的復雜性 。徐玉泉等[“〕從 某廢水中分離出一株能以苯酚為惟一碳源的菌株 phea一2，使用pcr一dgge技術對該菌165 rdna進行分析，發現該菌與醋酸鈣不動桿菌同源 。m盯sh等r了)利用pcr一dgge技術獲得了活性污泥 中真核微生物的種群變化情況 。王峰等下8〕采用 pcr一dgge技術對城市污水化學生物絮凝處理中 活性污泥和生物膜微生物種群結構進行了分析，結 果表明活性污泥培養前后微生物種群結構發生r 很大改變 。rapd技術也是一種應用比較廣泛的以多態性 引物來擴增某些片段的技術 。rapd技術可用于檢 測含有混合微生物種群的各種微生物反應器中微 生物的多樣性 。用rapd技術分析檢測實驗室規 模的油脂淤泥培養料中的細菌菌群發現，用油脂淤 泥改良過的培養料比未改良的更適于不同的微生 物種群生長[9j 。vainio等t 。〕從516種孤立的菌落 中提取出165rdna，經pcr擴增后進行測序，檢測 活性污泥中微生物種群的結構 。這些組合技術的 應用顯著增強r對微生物的檢測和鑒定能力，為理 論研究工藝優化及提高生物處理效率提供了條件 。2.3基因重組 基因工程技術應用于環境保護起始于20世紀 80年代 。其基本原理是通過基因分離和重組技術，將目的基因片段，比如可編碼降解某種污染物的 酶，轉移到受體生物細胞中并表達，使受體生物具 有該目的基因表達顯現的特殊性狀，從而達到治理 污染的目的 。找到特定污染的抗性基因，利用基因 重組技術轉基因后也可獲得其他抗性植株以及篩 選到可轉化污染物的植物，還可開發超量積累植物 進行污染土壤的生物修復 。羅如新等l”〕用放射性同位素標記tfdc基因片 段作探針，southemblot雜交定位ll菌株的鄰苯二 酚1，2一雙加氧酶基因位于pstl的i片段和bamh i的m、n片段，回收并將其直接克隆至表達載體 pkt230卜，獲得的重組子能轉化不具開環酶活性 的甲胺磷降解菌p2，得到高于天然宿主21倍的鄰 苯二酚1，2一雙加氧酶 。stingley等{”〕通過構建基 因文庫和重組質粒等基因工程方法證實了nidab 雙加氧酶是降解菲的關鍵酶類，并首次鑒定出此基 因通過磷苯二甲酸實現降解功能 。chae等”}發現 不能降解苯酚的su如lobusso扣taricu、98/2菌株中 的兒茶酚2，3一雙加氧酶基因與能降解苯酚的 sulfolo右u，，o如taricu、咫有[6j源區，分析得知它們 是山共同祖先進化而來 。把兒茶酚2，3一雙加氧酶 基因克隆到大腸桿菌中表達，可獲得有較高降解活 性的雙加氧酶 。重金屬污染是環境污染的重要方面之一 。隨 著分子生物學技術的發展，越來越多的修復性蛋白 基因正被從植物、微生物和動物中陸續分離出來，如汞離子還原酶基因、有機汞裂解酶基因、汞轉運 蛋自基因、金屬硫蛋白基因、植物絡合素合成酶基 因、鐵離子還原酶基因和鋅轉運蛋白基因l〕 。這些 基因通過基因工程的改造，重組到合適的受休細胞 中表達相應的蛋白質和酶，達到治理難以降解的有 毒有害污染物的目的 。sorsa等〔”〕把mts插人 lamb序列的153位點，在e.eoli中表達mts，解決 r細胞內mts對金屬離子有限的吸附能力 。綜l 所述，基因重組技術具有快速、高效的特性，已逐漸 成為環境生物技術的研究熱點 。2.4fish技術 fish技術利用核糖體內長度適中(約1500bp)、 高度保守的165:rna序列作為理想的基因分類靶 序列，其中使用的165:rna寡核普酸探針一般是 進行了熒光標記的20bp左右特異性核昔酸片段，利用該報告分子(如生物素、地高辛)與熒光素標記 的特異親和素之間的免疫化學反應，經熒光檢測系 統對待測dna進行定性、定量或相對定位分析 。fish技術能提供處理過程中微生物的數量、空間分 布和原位生理學等信息 。硝化細菌是一類生理上非常特殊的化能自氧 菌，傳統的研究方法要經過富集、分離、分類和鑒定 步驟，耗時長 。hsh技術的引人解決了上述困難 。flsh技術還被廣泛用于活性污泥系統、硝化流化床 反應器和膜生物反應器等廢水處理系統}61 。基因工程微生物越來越多地被用于農業害蟲 控制和環境污染的生物修復，對人類健康和環境的 影響引起廣泛關注 。1994年出現了一種新的標記 系統:綠色熒光蛋白(gfp)，由于gfp基因表達產 物對細胞沒有毒害作用，且由gfp產生的熒光標記 檢測卜分方便、簡單 。在某些被污染的環境中可分 離出降解該污染物的細菌，通過基因重組等手段使 用gfp分子標記，可更容易的分離檢測被標記的 細胞叫 。bastes等[8]進行了苯酚降解菌染色體gfp基 因標記實驗 。通過pcr和southemblot分析，證明 gfp基因已成功整合到宿主細胞的染色體中 。對 標記菌與野生型的降解能力比較結果證明，gfp分 子標記的插人并不影響細胞的苯酚降解能力 。用g即標記pseudomonasputida，研究活性淤 泥中細菌存活情況{9飛 。pseudomonasputida被轉到 活性淤泥2min后，觀察到細胞在淤泥絮凝物間自 由游動;培養3d后，發現熒光細胞減少，大部分已 被合并到淤泥絮凝物中，以防止細菌被原生動物捕 食 。用ofp標記石.eozi和serraliamarceseern，考 察菌株附到絮凝物卜的過程{()j 。使用表面熒光顯 微鏡能將帶有gfp標記的細胞從活性污泥中區分 開，井進行觀察和記數 。而聚焦激光掃描顯微鏡 (clsm)可使gfp標記細菌產生三維輪廓，結合表 面熒光顯微鏡和clsm觀察gfp標記細胞，結果表 明，細胞表面疏水性在細菌附到絮凝物的過程中起 重要作用，兩種細菌附在絮凝物上的模式有很大不 同，通過這種方法可更好地理解細菌赫附機理，有 助于提高廢水處理效果 。3結語 分子生物技術的應用使研究人員可從微觀的 角度更細致深人地了解微生物對污染物降解的具 體生理生化機制，在分子水平 _ _ [揭示生物體吸收、 遷移、積累有害物質最終被毒害，及適應、抗性等生 態問題，從而篩選到更多有利用價值的微生物 。隨 著越來越多微生物全部基因序列的解碼，對各種細 菌體內可降解基因的分布和表達會有更深人的了 解，有關技術的發展和成熟必將對污染物的降解過 程有一個整體的、生態水平上的認識 。參考文獻 l李鳳，劉世貴 . 分子生物學技術在環境微生物研究中的 應用 . 世界科技研究與發展，2003，25(4):88一92 2altsehulsf，gishw，millerw，etal.basieloealalign- mentsearehtool . jmolbiol，1990，215(3):403一410 3魏志琴，曾秀敏，宋培勇 . 土壤微生物dna提取方法研 究進展 . 遵義師范學院學報，2006，8(4):53一56 4faegria，torsvikvl，goksoyrj.baeteria]andfunga] aetivitiesin5011:separationofbacteriaandfungibyarapid fraetionatedeentrifugationteehnique5011biolbioehem，1977，9(2):105一112 5selvaratnams，sehoedelba，mefarlandbl，etal applieationofreversetranseriptasepcrformonitoring expressionoftheeataboliedmpngeneinaphenol- degradingsequencingbatehreaetor . appienviron microbiol，1995，61(11):3981一3985 6徐玉泉，張維，陳明等 . 一株苯酚降解菌的分離和鑒 定 . 環境科學學報，2000，20(4):450一455 7marshtl，liuwt，forneylj . beginningamoleeular analysisoftheeukiu洲aleollllllunityinaetivatedsludge. waterseitechnol，1998，37(4一5):455一460 8王峰，傅以鋼，夏四清等.pcr一dgge技術在城市污 水化學生物絮凝處理中的特點 . 環境科學，2004，25 (6):74一79 9涂書新，韋朝陽 . 我國生物修復技術的現狀與展望 . 地 理科學進展，2004，23(6):20一31 10vainioej，moilanena，koivulatt，etal . comparison ofpartial165rrnagenesequeneesobtainedfromactiva- tedsludgebaeteria . appimierobiolbioteehnol，1997，48 (l):73一79 11羅如新，張素琴，李順鵬 . 鄰苯二酚1，2一雙加氧酶

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