1、母種制作技術(shù)，一般處于保存期的大球蓋菇菌種的菌絲處在緩慢生長(zhǎng)或停止生產(chǎn)狀態(tài)，所以在制作生產(chǎn)用的母種前，必須對(duì)保存的菌種進(jìn)行復(fù)壯，以便將處于旺盛生長(zhǎng)狀態(tài)的菌種接入母種或原種培養(yǎng)基上，促進(jìn)菌絲快速生長(zhǎng)，獲得菌絲粗壯、濃白、生長(zhǎng)勢(shì)旺的菌種 。
（1）培養(yǎng)基配方：I號(hào)：PDA(馬鈴薯200g、葡萄糖18g、瓊脂18g、水1000m1) 。Ⅱ號(hào)：PDA 硫酸鎂1．5g 磷酸二氫鉀3g 蛋白胨2g、水1000ml 。Ⅲ號(hào)：馬鈴薯100g、干雜木屑100g、葡萄糖20g、瓊脂20g、水1000ml 。
上述配方的培養(yǎng)基經(jīng)高壓20分鐘滅菌消毒后制成試管斜面，3天內(nèi)用完 。
（2）制作方法：通過(guò)組織分離技術(shù)，將選取的大球蓋菇組織塊接入I號(hào)培養(yǎng)基上(或接入需復(fù)壯的保存種) 。在24到28℃條件下經(jīng)10至15天培養(yǎng)，菌絲長(zhǎng)至試管1：3--1：4時(shí)，挑取菌絲擴(kuò)展前端濃密、粗壯的部分轉(zhuǎn)入Ⅱ號(hào)或Ⅲ號(hào)培養(yǎng)基上，采用兩點(diǎn)接種法，以使菌絲迅速長(zhǎng)滿培養(yǎng)基表面(一般15到20天)提高菌絲的質(zhì)量 。經(jīng)Ⅱ號(hào)、Ⅲ號(hào)復(fù)壯培養(yǎng)基培養(yǎng)的菌絲表現(xiàn)為濃白、粗壯、生命力強(qiáng)，以利原種菌絲的生長(zhǎng)，縮短原種培養(yǎng)時(shí)間，提高成品率 。
2、原種及生產(chǎn)種制作
（1）配方：I號(hào)：小麥或大麥88％、米糠或麥麩10％、石膏或碳酸鈣1％、石灰0．5％、含水量65％(加入米糠或麩皮主要是使培養(yǎng)基疏松，增加透氣性 ， 菌絲走向好) 。Ⅱ號(hào)：小麥25％、稻草64％、麥麩10％、石膏粉1％、含水量65％--70％ 。Ⅲ號(hào)：雜木屑42％、雜刨木花42％、米糠或麥麩15％、硫酸鎂0．2％、石膏或碳酸鈣1％、含水量70％ 。
以上配方在1．3--1．5kg／平方米壓力下 ， 消毒2--2．5小時(shí)，3天內(nèi)用完 。
（2）原料選擇和配制：實(shí)踐證明：制作大球蓋菇原種和生產(chǎn)種的培養(yǎng)基主原料以麥粒最好，木屑、刨木花次之，稻草最差 。
（3）麥粒的選擇：應(yīng)選深黃或暗紅色皮韌性大、浸泡時(shí)不易破皮的麥粒為好，從吸水率來(lái)看大麥優(yōu)于小麥 。
（4）浸泡：浸泡分石灰水浸泡和清水浸泡預(yù)煮后加石灰兩種方法 。前者用1％石灰水浸泡 ， pH值9至10，在25℃小麥浸泡8至9小時(shí)，大麥浸泡9至10小時(shí)，夏季水溫高應(yīng)適當(dāng)縮短時(shí)間 。浸泡好的小麥粒，用手指甲掐麥粒凹陷，有較強(qiáng)的彈性，指甲印很快消失為宜 。后者用清水先浸麥粒，時(shí)間與上相同 。浸好的麥粒澇起用清水沖洗后瀝干 ， 放入鍋內(nèi)煮至剛沸為止?jié)称饹鲩_(kāi)，加入鋪料混合，用0．5％石灰調(diào)pH6．5左右，含水量65％ 。
（5）裝瓶及消毒：選用容積700ml，瓶口內(nèi)徑為3cm左右的淺白色耐高溫玻璃瓶(不宜用廣口瓶，以免雜菌侵入)，將配好混勻的培養(yǎng)料裝入瓶中 ， 每瓶裝200--300g為宜，在1．3至1．5kg／平方米壓力下消毒2--2．5小時(shí)，切忌消毒時(shí)間過(guò)長(zhǎng)以免麥粒呈糊狀 ， 導(dǎo)致透氣性和養(yǎng)分下降，影響菌絲生長(zhǎng) 。
(4)接種和培養(yǎng)：采取多點(diǎn)式接種 ， 即在瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)料四周按適當(dāng)?shù)木嚯x接種3--4點(diǎn)，料面上再接小塊菌種，在24--28℃條件下 ， 暗培養(yǎng)7--10天，菌絲萌發(fā)生長(zhǎng)至直徑4cm左右的菌斑時(shí)，立刻對(duì)菌絲進(jìn)行人工攪拌 ， 攪拌時(shí)接種點(diǎn)的菌絲被攪斷受刺激，同時(shí)由于開(kāi)瓶口(在超凈臺(tái)上進(jìn)行)實(shí)際上給菌絲起增氧作用 ， 有利于菌絲迅速生長(zhǎng) ， 一般整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程需25--30天可長(zhǎng)滿瓶 。
3、生產(chǎn)種制作：
(1)配方、培養(yǎng)基制作、瓶子選擇和消毒與原種相同 。
【蘑菇菌種的配制方法】(2)接種：將長(zhǎng)滿瓶的原種接種到生產(chǎn)培養(yǎng)基表面上，盡量鋪滿料面，以免雜菌污染，每瓶原種接不超過(guò)30瓶生產(chǎn)種 ， 在24--28℃條件下培養(yǎng)7--10天菌絲萌發(fā)生長(zhǎng)至潔白、濃密粗壯時(shí) ， 對(duì)菌絲進(jìn)行人工攪拌，攪斷菌絲，刺激其快速生長(zhǎng)，一般20--25天長(zhǎng)滿全瓶 。
